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单索引接头(Illumina)图片
产品货号:
WH0206
中文名称:
单索引接头(Illumina)
英文名称:
Single-Indexed Adapter
产品规格:
12×40μl|12×40μl|24×40μl
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品是专门针对于illimina高通量测序平台所开发的DNA接头。可用于illimina高通量测序平台下DNA和RNA文库的构建。试剂盒分为12种接头和24种接头两种形式,每种接头均含有唯一的6碱基index序列(barcode),以便于在多样品混合测序时进行不同样品的区分。

本制品提供的接头浓度为30μM,操作时的用法随着建库所用试剂盒、初始DNA处理量和DNA片段大小的不同而不同,具体信息请参考使用方法。另外,24种接头的Index序列详见接头序列信息部分。

产品特点:
·选择方便:分为setA和SetB两组提供24种单Index标记,可根据需求自由选择。
·使用方便:试剂盒中配备接头稀释液,稳定性强,直接用于接头溶液稀释。
·质量控制:批次间经严格质量控制和功能验证,保证index序列准确性。

适用范围:
1.本制品在二代测序(NGS)应用中,用于illimina高通量测序平台下DNA和RNA文库的构建;
2.本制品的具体应用包括:外显子测序,靶向测序,RNA-Seq,ChIP-Seq,以及定向测序和全基因组测序;
3.需要注意的是,本制品不适用于Illumina HiSeq XTM仪器及与甲基化相关的测序。

产品组成:
组分WH0206-AWH0206-BWH0206-AB
Single-Indexed Adapter(30μM)12×40μL12×40μL24×40μL
Adapter Dilution Buffer5×1.8mL5×1.8mL10×1.8mL

保存条件:-25℃~-15℃下保存,保质期一年。

Adapter Dilution Buffer成分:10mM Tris-HCl,10mM NaCl,1mM EDTA,pH8.0~8.5@25℃。

注意事项:(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1.使用过程中,建议将BaiSeq Single-Indexed Adapter置于冰上或冰盒中,而不要置于25℃以上的环境中,以免破坏接头的高级结构;
2.如需对接头进行稀释,请使用试剂盒自带的Adapter Dilution Buffer,而不要使用超纯水或者其他Buffer;
3.稀释后的接头最好在一天内用完,不建议将稀释后的接头长期保存或反复冻融;
4.实验耗材应保证无核酸酶和核酸污染,并尽量选择低核酸吸附性的耗材进行实验。另外,在实验过程中要注意避免接头之间的交叉污染。

兼容我司文库构建产品:
1.DNA Library DirectFast Construction Kit(illumina),目录号:WH0203;
2.DNA Library Fast Construction Kit(illumina),目录号:WH0204;
3.DNA Library Construction Kit(illumina),目录号:WH0200。

操作步骤:
1.如果稳定Single-Indexed Adapter在连接体系中的加入量为5μL的前提下,那么根据初始DNA处理量和DNA片段大小的不同,接头的工作液浓度如下表所示:
DNA处理量不同片段大小下的工作液浓度Adaper:Insert
(摩尔比)
200bp300bp400bp
1μg15μM10μM7.5μM10:1
500ng19μM12.5μM9.5μM25:1
250ng15μM10μM7.5μM40:1
100ng15μM10μM7.5μM100:1
50ng15μM10μM7.5μM200:1
25ng7.5μM5μM3.75μM200:1
10ng3μM2μM1.5μM200:1
5ng1.5μM1μM750nM200:1
2.5ng750nM500nM375nM200:1
1ng300nM200nM150nM200:1
0.25ng75nM50nM37.5nM200:1

2.使用我公司相关文库构建产品时(WH0203,WH0204和WH0200),根据相关产品的DNA处理量范围,按上表进行接头母液的稀释。
3.当使用其他公司文库构建产品时,若DNA处理量大于1μg,则按接头与插入片段摩尔比10:1的标准进行接头稀释;若DNA处理量小于0.25ng,则按接头与插入片段摩尔比200:1的标准进行接头稀释;而处理DNA的摩尔数按以下公式进行计算:
单索引接头计算公式
4.当处理DNA片段大小在表中也没有体现的情况下,处理DNA的摩尔数也按上述公式进行计算。

接头序列信息
本制品接头序列包括如下信息:
1.Universal Sequence
  5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT-3′
2.Index Including Sequence
  5'-GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGTCAC[index1-27]ATCTCGTATGCCGTCTTCTGCTTG-3'
3.Index编号和序列
WH0206-AWH0206-B
IndexSequenceIndexSequence
1ATCACG13AGTCAA
2CGATGT14AGTTCC
3TTAGGC15ATGTCA
4TGACCA16CCGTCC
5ACAGTG18GTCCGC
6GCCAAT19GTGAAA
7CAGATC20GTGGCC
8ACTTGA21GTTTCG
9GATCAG22CGTACG
10TAGCTT23GAGTGG
11GGCTAC25ACTGAT
12CTTGTA27ATTCCT

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